چکيد ه

  سابقه و هدف

  سلول‌های بنيادی خون‌ساز کيسه زرده به علت تکثير زياد و نداشتن آنتی‌ژن‌های وابسته به MHC برای مطالعات هماتوپويتيک مناسب‌تر هستند. با توجه به اثرات مثبت استفاده از سيستم هم کشتی در تمايز سلول‌‌های بنيادی، در اين تحقيق سعی شد از رده سلول M2-10B4 به همراه اريتروپويتين برای تمايز سلول‌های بنيادی کيسه زرده استفاده شود.

  مواد وروش‌‌ها

  کيسه زرده از موش‌‌های حامله 10 روزه جدا گرديد و با استفاده از سرنگ و سرسوزن‌‌های مختلف ( G 19، G 23 و G 27) و آنزيم کلاژناز 1/0% و يا تريپسين 2 5 /0% دارای EDTA 02/0% به سلول‌‌های منفرد تبديل شدند. سپس از سلول‌های رده M2-10B4 که فعاليت ميتوزی آن‌ها با ميتومايسين متوقف شده بود برای هم کشتی استفاده شد و به محيط کشت حاوی ng/ml 5 0 فاکتور سلول بنيادی و U/ml 1 اريتروپويتين اضافه و در37 درجه سانتی‌گراد و فشار 5 درصد CO₂ نگهداری شد . بعد از گذشت يک هفته رشد و تمايز سلول‌‌ها ، بررسی و سنجش کلنی در محيط نيمه جامد و رنگ آ ميزی بنزيدين صورت گرفت.

  يافته‌‌ها

  سلول‌‌ها برروی اين رده سلولی به‌خوبی رشد و تکثير ‌يافتند. البته درمحيط حاوی اريتروپويتين، رشد بهتری نسبت به محيط فاقدآن صورت گرفته بود وسلول‌‌های بنزيدين مثبت يا رده اريتروئيدی يبيشتری مشاهده‌ شد.

  نتيجه گيری

  می‌توان با انتخاب لايه پشتيبان مثل سلول‌‌های استرومايی مغزاستخوان و به‌کار بردن هورمون اريتروپويتين، درصد بيشتری رده اريتروئيدی به دست آورد، گرچه برای تعيين نوع خون سازی اوليه يا ثانويه نيازبه انجام تحقيقات تکميلی است.