چکيد ه

  سابقه و هدف

  در ارزيابی فعاليت سيستم کمپلمان و پی‌بردن به نقصان احتمالی در عملکرد اين سيستم ، غالباً از روش CH50 استفاده می‌شود . در اين روش گلبول‌های قرمز گوسفند با آنتی‌بادی اختصاصی پوشانيده شده و قابليت سيستم کمپلمان در تکميل ليز اين سلول‌ها ، مورد ارزيابی قرار می‌گيرد .

  در اين مطالعه ، به‌دليل نياز به آنتی‌بادی اختصاصی گلبول‌های قرمز گوسفند (SRBC) برای انجام آزمايش CH50 ، اقدام به توليد آنتی بادی پلی کلونال ويژه SRBC در حيوان خرگوش گرديد و آنتی بادی‌های توليدشده آمبوسپتور به روش‌های مختلف مورد ارزيابی قرار گرفتند.

  مواد و روش‌ها

  اين مطالعه از نوع تجربی (experimental) بود . برای انجام اين پژوهش ، تزريق گلبول کامل گوسفند يا آنتی‌ژن‌های غشايی آن با چند الگوی متفاوت به حيوان خرگوش صورت گرفت . آنتی بادی به دست آمده ، با استفاده از سرم پولد نرمال به عنوان منبع کمپلمان فعال (مربوط به حداقل 15 نفر از اهدا کنندگان خون) در روش CH50 بررسی و در نهايت مقدار جذب نوری (OD) مربوط به ميزان ليزگلبول‌ها در روش‌های مختلف با يکديگر مقايسه شد. در نهايت آناليز داده‌ها و مقايسه ميانگين مقادير OD541 در آزمايش CH50 با استفاده از آزمون (One-Sample) t انجام گرفت .

  يافته‌ها

  تزريق گلبول کامل گوسفند به حيوان خرگوش به دفعات متعدد با هر يک از الگوهای تزريقی و به طريق داخل صفاقی و يا وريدی ، منجر به تشکيل تيتـر مطلوبـی از آنتی بادی در اين حيوان شده، اما سبب مرگ زودهنگام آن‌ به علت شوک آنافيلاکتيک نيز می‌گردد. در حالی که استفاده از سلول‌های سونيکه شده و يا حرارت ديده در اين راستا ، منجر به توليد آنتی سرم هايـی می گردد که ضمن داشتن ويژگی مطلوب، بقای حيوان‌های مورد نظر را تهديد نمی‌نمايد .

  نتيجه گيری

  توليد آنتی بادی پلی‌کلونال بر عليه SRBC با استفاده از روش‌های مختلف ، ميسر می باشد . با اين حال اين مطالعه نشان می‌دهد ، چنانچه آنتی‌ژن‌های غشايی گلبول قرمز با روش سونيکاسيون و يا آنتی ژن‌های مقاوم به حرارت گلبول قرمز (Forssman) با به کارگيری حرارت 103 درجه سانتی‌گراد به دست آمده و جهت تزريق‌ و مصون سازی حيوان مورد استفاده قرار گيرند ، می‌توان بدون به مخاطره انداختن بقای حيوان، اقدام به توليد آنتی سرم با تيتر مطلوب نمود.

  کلمات کليدی : آنتی‌ژن فورسمن، CH50 ، SRBC