fa جداسازی، کلونينگ و بيان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکيب انسانی در رده سلولی CHO Isolation, cloning and expression of recombinant هماتولوژي Hematology پژوهشي Research جداسازی، کلونينگ و بيان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکيب انسانی در رده سلولی CHO راحله حلبيان1، ناصر شاگردی اسماعيلي2، آرزو اوودي2، ناصر مسروري3، دکتر ناصر اميری‌زاده4، دکتر کامران موسوی حسيني5، دکتر احمد قره‌باغيان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جليلي8، دکتر مهريار حبيبی رودکنار9 چکيده سابقه و هدف فاکتور VII ، يک گليکوپروتئين پلاسمايی است که در آبشار انعقادی تشکيل فيبرين، شرکت دارد. فاکتور VII در مسير انعقادی نقش مهمی داشته و آغازگر مسير خارجی انعقاد است. هدف اساسی اين مطالعه جداسازی و کلونينگ فاکتور VII نوترکيب انسانی و بيان آن در رده سلولی يوکاريوتی CHO جهت بيان فاکتور VII نوترکيب(FVII) بود. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. ابتدا cDNA ژن فاکتور VII از رده سلولی کبد انسان(HepG2) جدا شده و در وکتور(+) 1/3 pcDNA کلون شده سپس وکتور نوترکيب به داخل سلول‌های CHO ترانسفکت شد. در نهايت، يک کلون سلولی که به طور پيوسته فاکتور VII را بيان می‌کند تثبيت شد. بيان فاکتور VII نوترکيب توسط روش‌های RT-PCR ، الايزا، SDS-PAGE و وسترن بلات مورد بررسی قرار گرفت. هم چنين تاييد فعاليت بيولوژيکی فاکتور VII نوترکيب توسط آزمايش PT و ايجاد لخته در پلاسمای فاقد فاکتور VII صورت گرفت. يافته‌ها نتايج به دست آمده نشان‌دهنده کلونينگ و بيان موفقيت‌آميز ژن فاکتور VII بود. پس از 3 هفته کشت سلول‌های CHO در حضور جنتيسين، کلون سلول‌های پايدار به دست آمد. نتايج آزمايش‌های RT-PCR ، الايزا، SDS-PAGE و وسترن بلات حاصل از کلون‌ها، نشان‌دهنده بيان اين پروتئين در رده سلولی CHO بود. کاهش 3 الی 4 برابری در زمان انعقاد نشان‌دهنده وجود فعاليت بيولوژيکی فاکتور VII نوترکيب بيان شده بود. نتيجه گيري سالانه حدود 4000 الی 6000 ويال(33600 تا 50400 ميلی گرم) از اين فرآورده وارد کشور می‌شود که دولت را متحمل هزينه بسيار بالايی می‌کند. بنابراين توليد فاکتور VII نوترکيب با استفاده از فناوری DNA نوترکيب در سطح آزمايشگاهی، می‌تواند اولين گام در راه فايق آمدن بر مشکلات فوق باشد. Isolation, cloning and expression of recombinant human factor VII in CHO cell line Halabian R.1( MS ), Shagerdi Esmaili N.1( MS ), Oodi A.1( MS ), Masroori N.1(MS), Amirizadeh N.1(PhD), Mousavi Hosseini K.1(PhD), Gharehbaghian A.1(PhD), Rezvan H.1(PhD), Jalili M.A.1(PhD), Habibi Rudkenar M.1(PhD) 1Iranian Blood Transfusion Organization, Research Center, Tehran, Iran Abstract Background and Objectives Factor VII is a plasma glycoprotein that participates in the coagulation process leading to the generation of fibrin. Factor VII plays an important role in the cascade of coagulation. The aim of this study was to clone and express human recombinant factor VII in CHO cell line as an eukaryotic host cell. Materials and Methods In this descriptive study, FVII cDNA was isolated from HepG2 cell line and cloned to pcDNA 30.1(+) vector. The constructs were transfected to CHO cell line. A cell line that permanently expressed recombinant factor VII was established. The expression of recombinant FVII was determined by RT-PCR, ELISA, SDS-PAGE and western blot analysis. Biological activity of recombinant factor VII was determined by prothrombin time assay in factor FVII-depleted plasma. Results The results showed that FVII was successfully cloned and expressed. After 3 weeks stable cell lines were generated in the culture of the CHO cell line in the presence of geneticin. RT-PCR, ELISA, SDS-PAGE and western blot analysis results indicate the expression of FVII in the stable clones. A three- to four-fold decrease of the specific coagulant activity of rFVII was observed that indicates of rFVII being biologically active. Conclusions Four thousands to Six thousands vials of rFVII were imported to our country having high cost for the government. Therefore, production of rFVII through recombinant DNA technology within lab scale is the first step to overcome the problems. Key words: Hemophilia, rFVIIa, CHO, Transfection SJIBTO 2009 6(1): 1-11 Received: 21 Oct 2008 Accepted:21 May 2009 Correspondence: Habibi Roudkenar M., PhD of Biotechnology. Assistant professor of Iranian Blood Transfusion Organization-Research Center. P.O.Box: 14665-1157, Tehran, Iran. Tel: (+9821)88601599 Fax: (+9821)88601599 E-mail: roudkenar@ibto.ir هموفيلی، فاکتور VII نوترکيب، CHO ، ترانسفکشن Hemophilia, rFVIIa, CHO, Transfection 1 11 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-164-1&slc_lang=fa&sid=fa Mehryar Habibi Roudkenar مهريار حبيبی رودکنار roudkenar@ibto.ir 910031947532846003231 Yes P.O.Box: 14665-1157, Tehran, Iran. صندوق پستی: 1157-14665 R Halabian راحله حلبيان 910031947532846003232 No N Shagerdi Esmaili ناصر شاگردی اسماعيلی 910031947532846003233 No A Oodi آرزو اودی 910031947532846003234 No N Masroori ناصر مسروری 910031947532846003235 No N Amirizadeh ناصر اميری زاده 910031947532846003236 No K Mousavi Hosseini کامران موسوی حسينی 910031947532846003237 No A Gharehbaghian احمد قره باغيان 910031947532846003238 No H Rezvan حوری رضوان 910031947532846003239 No M.A Jalili محمدعلی جليلی 910031947532846003240 No

fa ميزان لکوسيت در کيسه‌های گلبول قرمز متراکم کاهش لکوسيت شده Leukoreduction in packed cells filtered by home-made هماتولوژي Hematology پژوهشي Research چکيده سابقه و هدف حضور گلبول‌های سفيد در تمامی فرآورده‌های خون که با روش‌های استاندارد به دست می‌آيد، سبب ايجاد واکنش‌های ناخواسته بيولوژيک بعد از انتقال خون می‌شود. با پيشرفت تکنولوژی ساخت فيلتر، امروزه از اين روش برای حذف لکوسيت‌ها استفاده می‌شود. لذا در اين تحقيق به ارزيابی عملکرد فيلترهای در کنار بستر ساخت داخل با به کارگيری روش استاندارد استفاده از غشاهای مصنوعی که به فلورسنت متصل شده‌اند وهمچنين روش آنتی‌بادی CD45 و آناليز فلوسايتومتری پرداخته شده است. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع کاربردی بود. به روش نمونه‌گيری تصادفی، تعداد 93 واحد گلبول قرمز متراکم از اهداکنندگان مستمر که روزانه به پايگاه انتقال خون تهران مراجعه می‌کردند تهيه و توسط دو گروه فيلترکاهش دهنده لکوسيت ساخت داخل، فيلتر شدند. هم چنين 8 فيلتر کنترل که دارای گواهينامه CE اروپا هستند نيز به عنوان گروه کنترل انتخاب شدند. نتايج حاصله در نرم‌افزار 5/11 SPSS وارد و تحت آزمون کای دو تجزيه و تحليل شد. يافته‌ها در 55 نمونه تحت بررسی که توسط فيلترهای گروه اول کاهش لکوسيت شده بودند، ميانگين تعداد لکوسيت‌های شمارش شده در کيسه‌های فيلتر شده به روش استفاده از آنتی‌بادی، متجاوز از 106×9 و به روش استاندارد bead حدود 106×10 بود. اين ميزان در 30 نمونه که با فيلترهای گروه دوم کاهش لکوسيت شدند در روش آنتی‌بادي106× 2/4 و به روش استاندارد bead 106×8/4 بود. در حالی که ميانگين تعداد لکوسيت‌های شمارش شده در 8 نمونه گروه کنترل که با استفاده از فيلترهای کنترل کاهش لکوسيت شده بودند، 106×3/2 لکوسيت و به مراتب کمتر از حداکثر قابل قبول استاندارد بود. نتيجه گيري پس از بهينه‌سازی تکنولوژی توليد و مواد اوليه، ميانگين لکوسيت‌ها در حد استاندارد قرار گرفت. 20% از موارد حاوی بيش از 106 × 5 لکوسيت و 80% کمتر از ميزان قيد شده را داشتند(3/34-7/5 و 95% CI:). به اين ترتيب متعاقب بهينه‌سازی، ميزان اختلاف ميانگين‌ها و انحراف از معيار در فيلترهای گروه دوم و کنترل، کاهش قابل توجهی يافت و در حد استانداردهای AABB قرار گرفت. Leukoreduction in packed cells filtered by home-made bedside filters prior and after optimization Abolghasemi H.1,2(MD), Aghaiipour M.1(MD), Nikougoftar M.1(MS), Amirizade N.1(PhD), Mohammadi M.T.3( MD),Rahmani S.4(MD), Atashrazm F.3(MS), Hadjati S.3(MS), Zarei P1.(BS) 1Iranian Blood Transfusion Organization, Research Center, Tehran, Iran 2Baghiatollah University of Medical Sciences, Tehran, Iran 3Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran 4Helal Iran Medical Devices Company, Karaj, Iran Abstract Background and Objectives Existence of leukocytes in all blood products causes a wide variety of side effects after transfusion. As a consequence, the use of filter technology for leukoreduction has been widely practiced. In this study, absolute leukocyte count in three types of home-made bedside filtered packed cell units is evaluated. Materials and Methods Ninety three packed cell units from blood donors were prepared in Tehran Regional Educational Blood Transfusion Center, stored at 4ºC, and filtered by two types of home-made filters within 1 hour at room temperature. The first type of filters was made prior to 2007 and the second type underwent optimization after 2007. Eight samples were filtered by control group filters with CE certificate. The results were analyzed with SPSS 11.5 and chi-square test. Results The mean values of leukocyte count/unit by CD45 and True Count Method were respectively 9×106 and 10×106 in 55 bags filtered by the first type filters and these values were 4.2×106 and 4.8×106 in 30 bags filtered by the second type filters, whereas the mean value of leukocyte count/bag in 8 bags filtered by control filters was 2.3×106. Conclusions After optimization of product technology and raw materials, the average number of leukocytes fell within the standard range. Twenty percent of cases contained more than 5×106 leukocytes and 80% less than that (CI95%= 5.7-34.3). Thus, following optimization, the differences in mean rates and SDs in both group two and control filters showed significant reduction and were measured to be within AABB standards. لکوسيت‌ها، فلوسايتومتری، ايران Leukocytes, Flow Cytometry, Iran 13 20 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-164-2&slc_lang=fa&sid=fa H Abolghasemi حسن ابوالقاسمی abolghasemi@ibto.ir 910031947532846003241 Yes 14665-1157, Tehran, Iran 14665-1157 M Aghaiipour مهناز آقايی‌پور 910031947532846003242 No M Nikougoftar مهين نيکوگفتار 910031947532846003243 No N Amirizadeh ناصر اميری زاده 910031947532846003244 No M.T Mohammadi محمدتقی محمدی 910031947532846003245 No S Rahmani سعيد رحمانی 910031947532846003246 No F Atashrazm فرزانه آتش رزم 910031947532846003247 No S Hadjati اسمرديس حاجتی 910031947532846003248 No P Zarei پرويز زارعی 910031947532846003249 No

fa بيان ژن نوکلئوستمين در لوسمی حاد پروميلوسيتيک در ارتباط با داروی ارسنيک تری‌ اکسيد و تمايز سلولی Nucleostemin gene expression in acute promyelocytic leukemia in relation to arsenic trioxide and cell differentiation هماتولوژي Hematology پژوهشي Research چکيد ه سابقه و هدف لوسمی حاد پروميلوسيتيک( APL )، يک لوسمی حاد ميلوئيدی تمايز‌پذير است. سابقاًَ اين تمايز توسط داروی ATRA امکان‌پذير بوده، اما اخيراًَ داروی ارسنيک تری‌اکسيد به اين روش درمانی اضافه شده است. مکانيسم‌های سلولی تمايز در اثر اين دارو هنوز به خوبی مشخص نگرديده است. در اين مطالعه رابطه تمايز سلولی داروی ارسنيک با ميزان بيان ژن نوکلئوستمين به عنوان يک عامل تکثير سلولی، مورد بررسی و مطالعه قرار گرفت. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تحليلی بود. در اين مطالعه از سلول NB4 که يک رده لوسمی حاد پروميلوسيتيک است استفاده شد و داروی ارسنيک با غلظت 5/0 ، 1 و 2 ميکرومول بر روی آن اثر داده شد و پس از 5 روز تاثير دارو، از نقطه نظر تمايز سلولی با استفاده از مارکر تمايزی CD11b و از نقطه نظر مولکولی با استفاده از بررسی بيان ژن نوکلئوستمين با استفاده از Real Time – PCR مورد بررسی قرار گرفت. نتايج آن با استفاده از آزمون من‌ويتنی بررسی و تحليل شد. يافته‌ها بر اساس نتايج به دست آمده، غلظت 5/0 ميکرومول از داروی ارسنيک نه تنها باعث ايجاد تمايز سلولی نشده بلکه باعث افزايش تکثير سلولی در ده روز اول کشت گرديد ولی غلظت يک ميکرومول دارو پس از 5 روز باعث افزايش درصد مارکر تمايزی CD11b از 2/5 به 6/13 درصد شد که اين تفاوت معنی‌دار می‌باشد. هم چنين غلظت يک ميکرومول داروی ارسنيک باعث کاهش بيان ژن نوکلئوستمين به صورت قابل توجه گرديد و تعداد کپی ژن از 130 به 70 رسيد که اختلاف آن معنی‌دار می‌باشد. نتيجه گيری بر اساس نتايج به دست آمده، غلظت يک ميکرومول از داروی ارسنيک در مدت 5 روز توانسته است افزايش جزئی در درصد CD11b ايجاد کند و در واقع باعث يک تمايز جزيی شده و در صورت افزايش مدت تماس دارو با سلول، ممکن است درصد بيان افزايش يابد. هم چنين افزايش درصد بيان CD11b و ايجاد تمايز سلولی همراه با کاهش بيان ژن نوکلئوستمين که يک عامل تکثير سلولی می‌باشد همراه بوده است. کلمات کليدی : لوسمی حاد پروميلوسيتيک، ارسنيک تری اکسيد، RT-PCR Abstract Background and Objectives Acute Promyelocytic Leukemia (APL) is one subtype of acute myeloblastic leukemia it responds to differentiation using All-Trans Retinoic Acid (ATRA). Recently, arsenic trioxide (As2O3) has been added to this method. The cellular mechanism of differentiation therapy by arsenic is not yet clear. We decided to study the relationship between cell differentiation using arsenic trioxide and nucleostemin gene as a proliferation marker. Materials and Methods In this descriptive study, we treated NB4 cell (a cell line in APL) with 0.5, 1, and 2 µM of arsenic trioxide in 6 well plates for five days. Then, cellular differentiation was assessed by flowcytometry for CD11b. Nucleostemin gene expression was also assessed by Real Time PCR. Results According to the results, cell proliferation has occurred by 0.5 µM arsenic trioxide and no differentiation was observed during 10 days of culture. With 1 µM concentration of arsenic, CD11b has raised from 5.2% to 13.6% during five days of culture (p < 0.001). Morever, 1 µM of arsenic caused decrease in nucleostemin gene copy number from 130 to 70. Conclusions According to the results, 1 µM of arsenic has increased CD11b in the cells and caused a partial differentiation during five days of culture. Increase in CD11b marker has also been associated with decrease in nucleostemin gene expression as a proliferation marker. � Key words : Leukemia, Promyelocytic, Acute, arsenic trioxide, RT- PCR� لوسمی حاد پروميلوسيتيک، ارسنيک تری اکسيد، RT-PCR Leukemia, Promyelocytic, Acute, arsenic trioxide, RT- PCR 21 29 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-164-3&slc_lang=fa&sid=fa F. Nadali فاطمه نادعلی Nadalifa@yahoo.com 910031947532846003160 Yes خيابان هزار جريب ـ کدپستی 176-81744 K. Ali Moghadam کامران علی مقدم 910031947532846003161 No Sh. Rostami شهربانو رستمی 910031947532846003162 No A. Ghavamzadeh اردشير قوام‌زاده 910031947532846003163 No

fa ارتباط عدم شباهت آنتی‌ژن‌های سازگاری نسجی فرعی HA-1 و وقوع GVHD حاد پس از پيوند سلول‌های بنيادی خونساز Relationship between HA-1 disparity and acute GVHD after hematopoietic stem cell transplanation سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research چکيد ه سابقه و هدف ناسازگاری HA-1 بين گيرنده و دهنده سلول‌های بنيادی خونساز با بروز GVHD حاد مطرح شده است. لذا هدف اين مطالعه ارزيابی فراوانی HA-1 و پايش ارتباط بين ناسازگاری HA-1 و بروز GVHD در بيماران ايرانی دريافت کننده پيوند سلول‌های بنيادی خونساز از خواهر يا برادر با شباهت HLA-A2 بود. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تحليلی بود. DNA استخراج شده از 55 جفت گيرنده ـ دهنده HLA-A2+ جمع‌آوری گرديد. تمامی بيماران پيوند، سلول‌های بنيادی خونساز را از منشا خون محيطی، از خواهر يا برادر با شباهت HLA دريافت کرده بودند. HA-1 به وسيله روش SSP-PCR شناسايی شد. يافته‌ها توسط نرم افزار 5/11 SPSS و آزمون‌های کای‌دو، z test و من‌ويتنی تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها 25 نفر از بيماران فاقد عارضه GVHD و 30 نفر، دارای اين عارضه با Grade (I-IV) بودند. فراوانی آلل‌های HA-1R و HA-1H در بيماران(دريافت کننده پيوند) به ترتيب 45/0 و 55/0 بود که تفاوت آشکاری با فراوانی اين آلل‌ها در اهداکنندگان پيوند(53/0 و 47/0) نشان نداد. ناسازگاری HA-1 در 8 جفت(5/14%) از 55 جفت گيرنده و دهنده پيوند شناسايی شد که 6 مورد از بيماران با عدم تشابه آنتی‌ژنی دچار عارضه GVHD شده و 2 مورد در گروه GVHD ‌(8%) بودند. آزمون آماری همبستگی X2 نشان داد که وقوع GVHD در دو گروه سازگار و ناسازگار تفاوتی ندارد. نتيجه گيری علی‌رغم فراوانی بيشتر ناسازگاری HA-1 در گروه GVHD+ ، نتايج حاصله بيانگر ارتباط آشکار بين ناسازگاری HA-1 و خطر بروز GVHD حاد نمی‌باشد. برای اثبات اين عامل، پيشنهاد می‌شود اين آنتی‌ژن با ساير آنتی‌ژن‌های ناسازگاری فرعی توأماًَ بررسی شوند. کلمات کليدی : PCR ، بيماری پيوند عليه ميزبان، آنتی‌ژن‌های سازگاری نسجی فرعی، پيوند سلول‌های بنيادی خونساز Abstract Background and Objectives It is suggested that HA-1 mismatching among hematopoietic stem cell recipients-donors be associated with acute graft-versus-host disease (aGVHD). So the aim of this study was to evaluate HA-1 frequency and examine the correlation between HA-1 disparity and GVHD patients who received transplantation from HLA-A2 identical siblings. Materials and Methods Extracted DNA samples were collected from 55 HLA-A2-positive donor-recipient pairs. All the patients received peripheral blood stem cell transplant (PSCT) from HLA-identical siblings. HA-1 was detected by SSP-PCR method. The HA-1 typing was performed using SSP method. Data were analyzed using Chi-square, Man withney and Z test with SPSS 11.5. Results Thirty patients showed to be GVHD I-IV and 25 pairs were without any GVHD signs. The frequency rates of HA-1R and HA-1H alleles in patients were 0.55 and 0.45, respectively it showed no significant difference with the frequency rates (0.53 and 0.47) of this allels in donors (p>0.05). HA-1 disparity was detected in 8 out of the 55 donor/recipient pairs (14.5%). aGVHD ( grades I-IV ) was occurred in 6 of patients. Two patients with HA-1 disparity did not show any GVHD signs. X2 test showed there was not any relationship between the incidence of acute graft-versus-host-disease (aGVHD) and HA-1 incompatibility in the patiens. Conclusions In spite of higher frequency of HA-1 disparity in GVHD+ group, our data did not reflect any significant association between HA-1 disparity and risk of acute GVHD. Key words : Polymerase Chain Reaction, Graft- Versus – Host Disease, Minor Histocompatibility Antigens , Hematopoietic Stem Cell Transplantation PCR ، بيماری پيوند عليه ميزبان، آنتی‌ژن‌های سازگاری نسجی فرعی، پيوند سلول‌های بنيادی خونساز Polymerase Chain Reaction, Graft- Versus – Host Disease, Minor Histocompatibility Antigens , Hematopoietic Stem Cell Transplantation 31 40 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-46-1&slc_lang=fa&sid=fa M. Shaiegan مژگان شايگان m.shaiegan@ibto.ir 910031947532846003164 Yes صندوق پستی: 1157-14665 S. Mohammadi سعيد محمدی 910031947532846003165 No Sh. Samiee شهرام سميعی 910031947532846003166 No K. Alimoghadam کامران علی مقدم 910031947532846003167 No Gh. Babaei غلامرضا بابايی 910031947532846003168 No A. Ghashghaiee انديشه قشقايی 910031947532846003169 No Sh. Rostami شهربانو رستمی 910031947532846003170 No F. Kkatami فرناز خاتمی 910031947532846003171 No A. Azarkeivan آزيتا آذرکيوان 910031947532846003172 No S. Zolfaghari سيما ذوالفقاری انارکی 910031947532846003173 No Z. Ataiee زهرا عطايی 910031947532846003174 No A. Ghavamzadeh اردشير قوام زاده 910031947532846003175 No

fa پيوند اتولوگ سلول‌های بنيادی مغز استخوان به روش سرپايی در بيماران مولتيپل ميلوما کانديد پيوند مراجعه کننده به بيمارستان شريعتی Out-patient stem cell transplantation in patients with multiple myeloma in Shariati Hospital سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research چکيد ه سابقه و هدف مولتيپل ميلوما، ناشی از تکثير بدخيم پلاسما سل‌های مشتق از يک کلون معيوب است. درمان بيماری با روش‌های حمايتی، شيمی درمانی تک دارويی و چند دارويی و پيوند سلول‌های بنيادی مغز استخوان به روش اتولوگ و آلوژن قابل انجام است. پيوند سلول‌های بنيادی مغز استخوان به روش بستری، از سال 1991 ميلادی در کشور در حال انجام است. هدف اين طرح انجام پيوند اتولوگ سلول‌های بنيادی مغز استخوان به روش سرپايی برای اولين بار در کشور می‌باشد. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع هيستوريکال کوهورت بود و نمونه‌گيری به روش آسان انجام شد. بيماران کانديد پيوند سلول‌های بنيادی مغز استخوان جهت درمان بيماری مولتيپل ميلوما ضمن انتخاب، طبق راه‌کار و به صورت سرپايی تحت پيوند قرار گرفتند. بيماران پس از دريافت پيوند، از بخش ترخيص شده و کليه دوره نوتروپنی خود را در منزل و تحت نظر تيم پيوند متشکل از پزشک عمومی دوره ديده، پرستار پيوند و همراه بيمار که به صورت روزانه بيمار را ويزيت می‌نمودند، گذراندند. کليه اطلاعات مربوط به بيماران و هم چنين جهت مقايسه، اطلاعات مربوط به بيمارانی که هم زمان به روش بستری پيوند می‌شدند، جمع‌آوری و کليه اطلاعات در نرم‌افزار 5/11 SPSS ذخيره و توسط آزمون‌های آماری ANOVA و منحنی کاپلان ماير تجزيه و تحليل گرديد. يافته‌ها مجموعاًَ 44 بيمار به روش سرپايی و بستری پيوند شدند. متوسط زمان بستری بيماران در روش بستری 28 (54-19) روز و در روش سرپايی 5/6(8-1) روز بود(001/0 p< ). هم چنين متوسط روزهای ويزيت در منزل، 5/10 روز بود. بيماران دو گروه از لحاظ تعداد روزهای مورد نياز جهت آفرزيس، ميزان GCSF مصرفی به عنوان موبيليزاسيون، MNC و CD34+ تزريقی تفاوت معنی‌داری نداشتند. تفاوت معنی‌داری در دو گروه از لحاظ نياز به فرآورده‌های خونی، آنتی‌بيوتيک تزريقی، ميزان مرگ و مير و عود کلی در مدت زمان پيگيری وجود داشت و هيچ کدام از بيماران در گروه سرپايی نياز به بستری مجدد جهت کنترل عوارض نداشتند(001/0 p< ). کاهش هزينه‌های پيوند در روش سرپايی نسبت به گروه بستری تا 70% بود(017/0 p< ). نتيجه گيری نتايج نشان‌ می‌دهد که پيوند سلول‌های بنيادی مغز استخوان به روش اتولوگ سرپايی در درمان بيماران مولتيپل ميلوما قابل انجام است. کاهش قابل توجه هزينه‌ها و عدم اشغال تخت‌های بخش پيوند از مزايای اين طرح است. کلمات کليدی : مولتيپل ميلوما، پيوند سلول‌های بنيادی، آفرزيس Abstract Background and Objectives Multiple myeloma (MM) is a clonal disorder of hematopoietic stem cell. We have been doing in-patient stem cell transplant (SCT) in Iran since 1991 however, this is the first time we have decided to embark on out-patient SCT. Materials and Methods In this cohort study, the selected Multiple Myeloma patients received outpatient stem cell transplantation. They were then discharged and followed by an out-patient SCT team including a general physician, a staff nurse and a care giver during the neutropenic period. All data were collected and analyzed using ANOVA test, Caplan mayer curve and SPSS 11.5. Results Forty four patients received in-patient or out-patient autologus SCT. The rates of median hospital stay were 28 (19-54) and 6.5 days (1-8) in in-patient and out-patient groups, respectively. Median home visit by team was 10.5 days. There were not significant differences (p<0.001) between these groups as far as apheresis days, granulocyte colony stimulatig factor (GCSF) dosage as mobilization, number of mono nuclear cell (MNC) or cluster of differentiation (CD)34+ cell parameters are concerned. There was also a significant decrease in total cost of SCT in out-patient group by 70% (p<0.017) including visit cost with 80% decrease (p<0.01), drug cost with 50% (p<0.004), laboratory cost with 70% (p<0.02), and hospital cost with 70% (p<0.04). Conclusions Our results show that out-patient autolgous SCT in multiple myeloma patients is feasible and its complications are manageable. Significant reduction in cost and bed requirement is also inevitable. Key words : Multiple Myeloma, Stem Cell Transplantation, Apheresis مولتيپل ميلوما، پيوند سلول‌های بنيادی، آفرزيس Multiple Myeloma, Stem Cell Transplantation, Apheresis 41 50 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-96-2&slc_lang=fa&sid=fa M. Khani محسن خانی Mohsenkhani53938@yahoo.com 910031947532846003196 Yes صندوق پستی: 611/14185 K. Alimoghadam کامران علی مقدم 910031947532846003197 No A. Karimi اکرم کريمی 910031947532846003198 No A. Mousavi اشرف موسوی 910031947532846003199 No A. Ghavamzadeh اردشير قوام‌زاده 910031947532846003200 No

fa فراوانی عفونت حاد ويروس هپاتيت A در بيماران مشکوک به هپاتيت Frequency of acute hepatitis A infection among hepatitis suspected patients بيماري هاي عفوني Infectious disease پژوهشي Research چکيد ه سابقه و هدف ويروس هپاتيت A ( Hepatitis A Virus ) عضو جنس هپاتو ويروس و از خانواده پيکورنا ويريده می‌باشد. در بچه‌های زير شش سال آلوده به ويروس، بيماری فاقد علايم است در حالی که ويروس در نوجوانان و بزرگسالان باعث ايجاد بيماری با علايم بالينی می‌شود. در اين مطالعه فراوانی عفونت حاد ويروس هپاتيت A در ميان گروه‌های سنی مختلف بيماران مراجعه کننده به مرکز انتقال خون تهران با روش‌های سرولوژيکی و مولکولی بررسی شد. مواد وروش‌ها اين تحقيق يک مطالعه مقطعی بود که در طول مدت يک سال از مهر 1385-1384 انجام شد. به روش سرشماری تعداد 308 بيمار مراجعه کننده به آزمايشگاه تشخيص طبی مرکز انتقال خون تهران، مورد بررسی قرار گرفتند. نمونه‌های سرم اين افراد از جهت هپاتيت‌های ويروسی A ، B و C با استفاده از کيت‌های تجارتی و با روش الايزا بررسی شدند. HAV-RNA با روش Nested RT-PCR مورد شناسايی قرار گرفت. يافته‌ها توسط نرم‌افزار 5/11 SPSS و آزمون آماری کای‌دو، تجزيه و تحليل شدند. يافته‌ها تعداد 62 نمونه از 308 بيمار که از نظر هپاتيت‌های ويروسی B و C مثبت بودند، از مطالعه خارج شدند و مطالعه بر روی 246 بيمار ادامه يافت. آنتی‌بادی‌های IgM عليه ويروس هپاتيت A در 29 بيمار(8/11% ، 83/15 – 77/7 = 95% CI: ) از 246 بيمار حضور داشت. فراوانی آنتی‌بادی‌های IgM عليه ويروس هپاتيت A در گروه‌های سنی 10-0 ، 20-11، 30-21، 40-31 ، 40 > به ترتيب 8/17%، 1/23%، 7/14%، 2/3% و 0% بود. HAV-RNA در 25 بيمار(2/86%) از 29 نمونه سرم مثبت بود. فراوانی عفونت در گروه‌های سنی 20-11 سال به طور معنی‌داری بيشتر از ديگر گروه‌های سنی بود. نتيجه گيری با بهبود شرايط بهداشتی در جامعه، لازم است مطالعه‌های جامعی بر روی عفونت ويروس هپاتيت A در گروه‌های سنی مختلف انجام شود. اين اطلاعات در آينده برای طراحی برنامه‌‌های پيشگيری از قبيل واکسيناسيون عليه ويروس هپاتيت A مفيد خواهد بود. کلمات کليدی : ويروس هپاتيت A ، RT-PCR ، بروز، ايمونوگلوبولين M Abstract Background and Objectives Hepatitis A virus (HAV) is a hepatotropic virus and a member of the Hepatovirus genus within the Picorna-viridae family. Among HAV-infected individuals, children under 6 years old are typically asymptomatic, whereas older children and adults develop jaundice. Studies carried out in different regions of the world have demonstrated a reduction of HAV infection in children under five and a gradual increase among adolescents and adults. The frequency of acute hepatitis A infection was investigated among different age groups by molecular and serological procedures in this study. Materials and Methods This research was a cross sectional study. During the period of 12 months, from October 2005 to 2006, a total of 308 patients with a diagnosis of Hepatitis A were admitted and analyzed at Tehran Regional Educational Blood Transfusion Center in Tehran. The serum samples were tested for viral hepatitis (HAV, HBV , and HCV). Of these samples, 62 were positive for HBV or HCV and were excluded from this study. The 246 remaining serum samples were included. Serum specimens were tested for IgM anti-HAV antibody using a commercial enzyme immunoassay. Differences in the prevalence of IgM anti-HAV among different age groups were analyzed using the chi-square test. HAV RNA was detected by nested Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction (RT-PCR). Results IgM anti-HAV antibodies were detected in 29 (11.8%, CI 95%= 7.77-15.83) of 246 patients. The frequency rates of IgM anti-HAV antibodies in the studied population were 17.8% within the age range of 0-10 years, 23.1% within the range of 11-20 years, 14.7% within the range of 21-30 years, 3.2% within the range of 31-40 years, and 0% within the age range of above 40 years. Significant difference was observed between different age groups. The frequency of IgM anti-HAV was higher within the age range of 11-20 years (23.1%) as compared to other age groups. HAV RNA was detected in 25 of 29 (86.2%) serum samples. Conclusions With improvement in sanitary conditions, it is necessary to perform new studies on HAV infection prevalence and incidence in different age groups of the country. These data will be useful for future vaccination planning. Key words: Hepatitis A virus, Incidence, IgM, RT-PCR ويروس هپاتيت A ، RT-PCR ، بروز، ايمونوگلوبولين M Hepatitis A virus, Incidence, IgM, RT-PCR 51 57 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-53-1&slc_lang=fa&sid=fa Z. Sharifi زهره شريفی z-sharifi@ibto.ir 910031947532846003229 Yes M. Mahmoodian Shooshtari محمود محموديان شوشتری 910031947532846003230 No

fa شيوع اختلال عملکرد تيروئيد و عوامل مرتبط با آن در بيماران تالاسمی مراجعه کننده به آزمايشگاه تشخيص طبی سازمان انتقال خون Prevalence of thyroid dysfunction and relevant risk factors among thalassmia patients having referred to Iranian Blood Transfusion Organization Clinical Laboratory of Tehran اندوكرينولوژي Endocrinology پژوهشي Research چکيد ه سابقه و هدف تالاسمی به عنوان شايع‌ترين کم خونی مادرزادی در ايران به شمار می‌رود. علی‌رغم مراقبت‌های هماتولوژيک، اختلال در عملکرد غدد درون‌ريز مشکل شايعی در اين بيماران می‌باشد. هدف اصلی اين مطالعه، بررسی شيوع اختلال عملکرد تيروئيد در بيماران مبتلا به انواع تالاسمی بود. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع توصيفی مقطعی بود. در زمستان 1385، پرسشنامه برای 195 بيمار ارجاعی از درمانگاه تالاسمی به آزمايشگاه تشخيص طبی سازمان انتقال خون تهيه شد و در آن سن، جنس، زمان طحال‌برداری، ميزان و فواصل تزريق خون، ميزان دفروکسامين دريافتی، نوع تالاسمی، ميزان هورمون‌های تيروئيد و فريتين سرم ثبت شد، سپس ارتباط بين عملکرد تيروئيد با متغيرهای کلی در دو گروه تالاسمی ماژور و اينتر مديا توسط آزمون‌های آماری t-test ، کای‌دو، دقيق فيشر و نرم‌افزار 5/11 SPSS بررسی شد. يافته‌ها از 195 بيمار تالاسمی مورد بررسی، 178(3/91%) بيمار مبتلا به تالاسمی ماژور(4/49% زن، ميانگين سنی 8 ± 2/17 سال) و 17(7/8%) بيمار مبتلا به تالاسمی اينتر مديا(5/76% زن، ميانگين سنی 8/8 ± 2/23 سال) بودند. شيوع موارد يوتيروئيد، هيپوتيروئيديسم تحت بالينی و هيپوتيروئيديسم اوليه به ترتيب 1/83%، 8/13% و 1/3% بود. ميانگين غلظت فريتين در افراد يوتيروئيد ng/ml 1470 ± 1923، در هيپوتيروئيديسم تحت بالينی ng/ml 1346 ± 1723 و در هيپوتيروئيديسم اوليه ng/ml 734 ± 1569 به دست آمد. ارتباط معنی‌داری بين اختلال عملکرد تيروئيد با فريتين، سن، نوع تالاسمی، طحال‌برداری و دفروکسامين دريافتی ديده نشد. نتيجه گيری بر اساس نتايج به دست آمده، بيماران تالاسمی ماژور با اختلال در عملکرد غده تيروئيد از جمله کم کاری تيروئيد روبرو می‌باشند. لذا درمان مؤثرتر بادفروکسامين و پی‌گيری منظم اين افراد جهت بررسی احتمال بروز کم کاری تيروئيد و درمان به موقع اين عارضه توصيه می‌گردد. کلمات کليدی : تالاسمی، غده تيروئيد، هيپوتيروئيديسم Abstract Background and Objectives Thalassemia is the most common hereditary anemia in Iran. Despite improved hematologic care, multi endocrine dysfunction is a common complication in these patients. The main objective of this study was to estimate the prevalence of thyroid dysfunction in patients including both thalassemia major and thalassemia intermedia. Materials and Methods In this descriptive cross sectional study, a questionnaire was designed for 195 patients who were reffered to Iranian Blood Transfusion Organization Clinical Laboratory of Tehran from Thalassemia Clinic in Winter 2007. The following items were brought up in the questionnaire: sex, age, height, weight, splenectomy time, amount of transfused blood, blood transfusion interval, desferoxamine dosage, type of thalassemia (major or intermedia), serum thyroid hormones, and ferritin levels. Then, the correlation of thyroid functional status with age, serum ferritin level, type of thalassemia, splenectomy and desferoxamine dosage was evaluated in both β thalassemia major and thalassemia intermedia groups. � Results We had 178(91.3%) β thalassemia major (50.6% male, 49.4% female with the mean age of 17.2 ± 8 years) and 17(8.7%) thalassemia intermedia (23.5% male, 76.5% female with the mean age of 23.2 ± 8.8 years). One hundred sixty two (83.1%) patients were euthyroid, 27 (13.8%) had subclinical hypothyroidism (CI 95%= 9-18.6), and 6(3.1%) were primary hypothyroid (CI 95%�= 0.7-5.5). Mean ferritin levels for euthyroid group were 1923 ± 1470 ng/ml, for subclinical hypothyroidism group 1723 ± 1346 ng/ml, and for primary hypothyroidism 1569 ± 734 ng/ml, respectively. No significant correlation was found between abnormal thyroid function (subclinical and primary hypothyroidism) and serum ferritin levels (p=0.55), age (p=0.11) , type of thalassemia (p=0.68), splenectomy (p=0.62) and desferoxamine dosage (p=0.33). Conclusions Based on our results, thalassemia patients present a sort of thyroid dysfunction such as hypothyroidism. So, more effective treatment with desferoxamine and regular follow up of patients for evaluation of thyroid function satus are recommended. � Key words : Thalassemia, Thyroid Gland, Hypothyroidism تالاسمی، غده تيروئيد، هيپوتيروئيديسم Thalassemia, Thyroid Gland, Hypothyroidism 59 64 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-60-1&slc_lang=fa&sid=fa F. Jalali Farahani فريده جلالی فراهانی f.jalali@ibto.ir 910031947532846003183 Yes صندوق پستی: 1157-14665 S. Zolgaghari سيما ذوالفقاری انارکی 910031947532846003184 No A. Talebian علی طالبيان 910031947532846003185 No A. Azarkeivan آزيتا آذرکيوان 910031947532846003186 No M. Maghsudlu مهتاب مقصودلو 910031947532846003187 No M. Sarmadi مهرنوش سرمدی 910031947532846003188 No Sh. Fatemi شيوا فاطمی 910031947532846003189 No A. Shahrabi اکرم شهرابی 910031947532846003190 No Z. Taherkhani زهرا طاهرخانی 910031947532846003191 No

fa تيتر آنتی‌بادی عليه هپاتيت B در کارکنان بيمارستان امام حسين(ع) شاهرود HBs Ab level in clinical personnel of Immam Hossein Hospital of Shahrood بيماري هاي عفوني Infectious disease پژوهشي Research چکيد ه سابقه و هدف عفونت هپاتيت B يکی از شايع‌ترين عفونت‌های عارضه‌دار بوده و حدود 300 ميليون نفر در جهان مبتلا به اين ويروس هستند. پرسنل پزشکی و پيراپزشکی در معرض خطر ابتلا به اين ويروس می‌باشند. واکسيناسيون و بررسی تيتر آنتی‌بادی ايجاد شده در اين افراد، در کنترل ويروس بسيار مهم و ضروری است. مواد وروش‌ها اين مطالعه به صورت توصيفی ـ تحليلی بر روی 501 نفر از پرسنل درمانی بيمارستان امام حسين(ع) شاهرود که واکسن هپاتيت B را دريافت نموده بودند، صورت گرفت. تيتر آنتی‌بادی عليه هپاتيت B به روش استاندارد در آنان سنجيده شد. اطلاعات حاصله ثبت و با پرسشنامه اختصاصی هر نفر تلفيق شده و با استفاده از نرم‌افزار آماری 16 SPSS و آزمون‌های کای‌‌دو و ضريب همبستگی مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. يافته‌ها از 501 نفر مورد بررسی، 293 نفر(5/58%) زن و 207 نفر(5/41%) مرد بودند. ميانگين سنی شرکت‌کنندگان 65/8 ± 38/34 سال و ميانگين BMI معادل 17/3 ± 13/24 کيلوگرم بر متر مربع به دست آمد. متوسط سطح تيتر آنتی‌بادی عليه هپاتيت B معادل mIu/ml 3/12 ± 13/58 به دست آمد و درصد تيتر قابل حفاظت در زنان با 96/97 درصد بيشتر از مردان با 69/94 درصد به دست آمد. نتيجه گيری با توجه به اين که پرسنل گروه درمانی در معرض آلودگی بالايی با اين عفونت قرار دارند، کنترل تزريق سه نوبت واکسن هپاتيت B در پرسنل درمانی بسيار ضروری است و تيتر آنتی‌بادی اين افراد بايد به طور منظم کنترل شود. کلمات کليدی : هپاتيت B ،‌ آنتی‌بادی‌ها، واکسيناسيون Abstract Background and Objectives HBV infection is one of the most common infections with side effects. Clinical personnel are at risk for HBV infection so immunization with vaccine and detection of HBs Ab level are very important. Materials and Methods This study is a descriptive analytic research on 501 clinical personnel that had received HBV vaccine. HBs Ab titres were estimated with standard kits and the final analysis was made by using X2 , simple scatter methods and SPSS 16. � Results Out of 501 patients, 293 (58.5%) were female and 207 (41.5%) male. The age average was 34.38 ± 8.65 years and the average BMI was 24.13 ± 3.17. The average HBs Ab titre was 58.13± 12.3 mIU/ml and the average HBs Ab titre was higher in women than men (p<0.05). Conclusions Immunization with HBV vaccine is very necessary for clinical personnel especially hospital care workers. Moreover, HBs Ab titre of such cases should be regularly evaluated. � Key words : Hepatitis B, Antibodies, Vaccination هپاتيت B ،‌ آنتی‌بادی‌ها، واکسيناسيون Hepatitis B, Antibodies, Vaccination 65 69 http://www.bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-60-2&slc_lang=fa&sid=fa M.B. Sohrabi محمد باقر سهرابی Mb.Sohrabi@yahoo.com 910031947532846003192 Yes بيمارستان امام حسين (ع) کدپستی: 3616911151 J. Sarafha جواد صراف‌ها 910031947532846003193 No P. Zolgaghari پونه ذوالفقاری 910031947532846003194 No Z. Eskandari زهرا اسکندری 910031947532846003195 No